CITOMETRÍA DE FLUJO APLICACIONES CLINICAS

Descripcion del curso:

Este curso contemplara de manera teorico práctica la Citometría de flujo como tecnología biofísica que permite estudiar las características estructurales y funcionales de células o partículas en suspensión basada en la utilización del láser. Para lograr un adecuado uso de esta tecnología es muy importante conocer aspectos, no solo teóricos si no metodológicos, como el manejo de la muestra, calibración y compensación de la fluorescencia, interpretación de datos y análisis de estos.

Para ello analizaremos todo lo relacionado con el análisis de datos y los tipos de gráficos que arrojan los equipos de citometría de flujo, ademas estudiaremos el análisis celular de células normales y anormales sus aplicaciones clínicas para el diagnóstico hematológico de algunas patologías por citometría de flujo. Se aprenderán las diferentes técnicas para identificar ciclo celular, contenido de ARN y técnicas de análisis de DNA asi como las subrutinas de muerte célular y las pruebas de integridad para identificar muerte celular por citometría de flujo.

TEMARIO

Modulo I: Introducción a la citometría de flujo

• Concepto, definición, descripcion de la tecnica y principios de la citometría de flujo.
• Niveles de análisis de la Citometría.
• Protocolos y preparación de muestras para citometría de flujo.
• Equipos e insumos utilizados (El citómetro y los sistemas que lo componen)
• Concepto de fluorescencia, fluorocromos y colorantes, reactivos fluorescentes).
• Seguridad de los equipos. Comparación con otras técnicas. Visualización de espectros de fluorescencia y combinaciones de fluorocromos

Modulo II: Principios básicos de análisis de datos

• Principios básicosdel análisis de datos (light scatter, fluorescencia).
• Tipos de gráficos utilizados. Concepto de Gates.
• Aplicaciones clínicas: Diagnóstico basado en el análisis celular (células normales y anormales).
• Pronostico basado en el análisis celular
• Evaluación y monitorización de tratamiento.

Modulo III: Inmunofluorescencia y compensación (Aplicaciones clínicas 1 diagnóstico hematológico)

• Diagnóstico basado en el análisis celular (células normales y anormales).
• Pronostico basado en el análisis celular
• Evaluación y monitorización de tratamiento. Inmunofluorescencia y compensación.

Modulo IV: Análisis de ADN, ciclo celular y proliferación por citometría de flujo (Aplicación clínica 2 Cuantificación de células en ciclo celular)

• Análisis de contenido de ADN: aplicaciones clínicas y de investigación básica.
• Cuantificación de contenido de ARN
• Análisis cromosomal y karyotipeo
• Técnicas de BrdU, BrdU/Hoechst/PI
• Concepto y análisis de sincronización
• Método de dilución de sondas

Modulo V: Muerte celular por citometría de flujo (Aplicaciones clínicas y de investigación 3: cuantificación de células viables y muerte celular).

• Introducción a subrutinas de muerte celular.
• Pruebas de integridad del ADN (TUNEL) y de membrana celular (Anexina).
• Análisis de muerte celular

Destinado:

El programa está dirigido a estudiantes universitarios, egresados y profesionales, de las áreas de Biotecnología, Inmunologia, Microbiologia, Bioquimica, Bioclinica, Biomedicina, Bioingenieria, Medicina y afines interesados en aprender mas sobre la Citometría de Flujo.